زیست شناسی بررسی اثرات غلظتهای مختلف سدیم کلرید بر کشت بافت ... |
دانشگاه آزاد اسلامی
واحد دامغان
پایان نامه برای دریافت درجه ی کارشناسی ارشد در رشته علوم گیاهی
گرایش تکوین
عنوان
بررسی اثرات غلظتهای مختلف سدیم کلرید ( NaCl) بر کشت بافت بنفشه آفریقایی(Saintpaulia inantha)
استاد راهنما
دکترمصطفی عبادی
استاد مشاور
دکترحسین عباسپور
برای رعایت حریم خصوصی نام نگارنده درج نمی شود
تکه هایی از متن به عنوان نمونه : (ممکن است هنگام انتقال از فایل اصلی به داخل سایت بعضی متون به هم بریزد یا بعضی نمادها و اشکال درج نشود ولی در فایل دانلودی همه چیز مرتب و کامل است)
فهرست مطالب
چکیده 1
مقدمه. 2
فصل اول/ کلیات تحقیق
1-1 گیاهشناسی بنفشه آفریقایی: 8
1-2 خاستگاه و پراکنش بنفشه آفریقایی.. 10
1-3 گونههای مهم بنفشه آفریقایی: 11
1-4 برخی گونههای فهرست شده به دنبال طبقه بندیBurtt. 11
1-5 کشت و تکثیر: 13
1-6 شرایط کشت بنفشه آفریقایی: 13
1-6-1 دما: 13
1-6-2 نور: 14
1-6-3 تنظیم رطوبت: 15
1-6-4 مقدار دی اکسید کربن: 15
1-6-5 مواد رشد: 15
1-6-6 آب دهی: 15
1-7 مشخصات و انواع خاک: 16
1-8 تغذیه گیاه: 16
1-8-1 نیتروژن: 16
1-8-2 فسفر: 17
1-8-3 پتاسیم: 17
1-8-4 منیزیم: 17
1-8-5 کلسیم: 17
1-8-6 گوگرد: 17
1-9 بیماریهای مربوط به بنفشه آفریقایی.. 18
1-9-1 زردی برگ: 18
1-9-2 برگهای رنگ پریده با ساقه های بلند: 18
1-9-3 ندادن گل: 18
1-9-4 بیماری های ناشی از قارچ: 18
1-9-4-1 شل شدن برگها و پوسیدگی ریشه: 19
1-9-4-2کپک زدن برگها و گلها: 19
1-9-4-3 بیماری پوسیدگی یا کپک قارچی: 19
1-9-5 بیماریهای ویروسی: 20
1-9-6 آفات: 20
1-9-7 کپک پودری ((Oidium SPP: 21
1- 10 اهمیت بنفشه آفریقایی: 21
1-11اصلاح بنفشه آفریقایی.. 22
1-11-1روشهای اصلاحی.. 22
1-12کشت بافت: 22
1-13تاریخچه کشت بافت گیاهی: 22
1-14 اهمیت كشت بافت گیاهی: 30
1-16 تکنیک های کشت بافت گیاهی: 31
1-16-1 کشت کالوس: 31
1-16-2 کشت سلولی : 31
1-16-3 کشت اندام : 32
1-16-4 کشت مریستم و ریخت زایی یا مرفوژنز : 32
1-16-5 جداسازی اسپتیک پروتوپلاست های گیاهان. 32
1-17 کاربردهای مهم کشت بافت گیاه: 32
1-18 محدودیتها یا همان معایب کار. 33
1-19 موارد کاربردی در کشاورزی: 34
1-20 موارد کاربرد ی در صنعت: 34
1-21 اهمیت و کاربرد کشت بافت در باغبانی: 34
1-22 انواع کشت در شیشه: 35
1-22-1 سازمان یافته : 35
1-22-2 سازمان نیافته : 35
1- 23 انواع مختلفی از كشت در شیشه نیز وجود دارد. 36
1-23-1 كشت گیاه كامل: 36
1-23-2 كشت جنین: 36
1-23-3 كشت كالوس: 36
1-23-4 كشت سلول : 36
1-23-5 كشت پروتوپلاست : 37
1-24کلر: 37
1-25 پراکسیداز: 38
1-26 کاتالاز: 38
1-27 کلروفیل: 39
1-28 پرولین: 40
1-29 کربوهیدراتهای محلول و نا محلول: 41
1-30 شوری: 41
1-31 مکانیسم اثر شوری: 42
1-32 تاثیر در ساختار ریختی: 44
1-33 اثرات تنش شوری بر پارامترهای رشد در گیاه: 44
1-34 تغییر در ساختار تشریحی: 46
1- 35 تغییر در ساختار مریستمها: 46
1-36 اثرات تنش شوری بر فتوسنتز: 46
فصل دوم/ مروری بر تحقیقات انجام شده
2-1 روشهای ریز ازدیادی بنفشه آفریقایی.. 49
2-1-1 بیلکی و همکارانش: 49
2-1-2کوک.. 50
2-1-3 شریفی و همکاران. 51
2-1-4 سیف الله خان و همکاران. 51
2-1-5 سمیرحسین و همکاران. 52
2-1-6 ویچادا سانپوی و همکارانش… 52
2-1-7 عبادی وهمکارانش… 53
2-1-8 عبادی و همکارانش… 53
2-1-9 مارکس و همکارانش… 54
2-2 اثرات تنش شوری بر گیاهان. 54
2-2-1 اثر شوری بر دیواره سلولی.. 54
2-2-2 اثر شوری بر غشا: 55
2-2-3 اثر شوری بر تراکم یونها در گیاه: 55
2-2-4 اثر شوری بر اسمولیتها: 58
2-2-5 اثر شوری بر پرولین: 59
مواد و روشها /فصل سوم
3-1 تهیه محلول های ذخیره و محیط کشت: 62
3-1-1 محلول های مادری نمک های پرمصرف با غلظت 10 برابر ( ): 62
3-1-2 محلول های مادری نمک های کم مصرف با غلظت 1000برابر (1000 × ) 63
3-1-3 محلول مادری Na2. EDTA.2H2O , FeSO4. 7H2O با غلظت 10 برابر (10 × ) 63
3-1-4 محلول مادری ویتامین ها و گلایسین 100 برابر (100 ×) : 64
3-1-5 محلول مادری هورمون ها: 64
3-2 تهیه یک لیتر محیط کشت پایه MS از محلول های مادری: 65
3-2-1 اکسین: 65
3-2-2سیتوکنین (BAP): 65
3-2-3 ویتامینها: 65
3-2-4 میواینوزیتول: 66
3-2-5 عامل ژلی: 66
3-3 روش تهیه گیاه پایه استریل: 66
3-3-1 مراحل سترون سازی.. 66
3-3-2 سترون سازی برگها : 66
3-3-3 سترون سازی محیط و وسایل کار: 67
3-4 تولید گیاهان سترون جهت تیمارهای مختلف: 68
3-5 کشت گیاه در محیط های تیماری: 68
3-6 آنالیز رشد: 69
3-7 سنجش رنگیزه های فتوسنتزی (آرنون، 1957): 69
3-8 سنجش کربوهیدرات (کوچرت،1978): 70
3-8-1 اندازه گیری قندهای محلول: 70
3-8-2 اندازه گیری قندهای نامحلول ( نشاسته ): 71
3-9 سنجش پرولین (باتیس و همکاران، 1973): 71
3-10 سنجش فعالیت آنزیمی.. 72
3-10-1 سنجش آنزیم پراکسیداز (کوری1989) 72
3-10-2. سنجش آنزیم کاتالاز (چانز،1955) 73
3-11. سنجش پروتئین ها (لاوری و همکاران، 1951) 73
فصل چهارم/ نتایج تحقیق
4-1 اثر غلظتهای مختلف کلرید سدیم بر خصوصیات مورفولوژیکی و رویشی گل بنفشه آفریقایی.. 76
4-2 نتایج حاصل از اثرات مختلف کلرید سدیم پس از 40 روز تیمار در محیط کشت پایه MS. 78
4-2-1 تغییرات حاصل از اثرات تیمار با غلظتهای مختلف کلرید سدیم در پارامترهای رشد. 78
4-2-1-1 تغییرات وزن تر اندام هوایی در گیاه 40 روزه بنفشه آفریقایی: 78
4-2-1-2 تغییرات وزن خشک اندام گیاهی در گیاه بنفشه آفریقایی.. 79
4-2-1-3 تغییرات سطح برگ در گیاه 40 روزه بنفشه آفریقایی: 80
4-2-1-4 تغییرات تعداد برگ در گیاه 40 روزه بنفشه آفریقایی.. 81
4-2-1-5 نسبت سطح برگ LAR ( Area Ratio Leaf) در گیاه 40 روزه بنفشه آفریقایی.. 82
4-2-1-6 وزن مخصوص برگ SLW (Specific Leaf Weight) گیاه 40 روزه بنفشه آفریقایی.. 83
4-3 تغییرات بیوشیمیایی و فیزیولوژیکی در گیاه 40 روزه بنفشه آفریقایی.. 84
4-3-1 سنجش میزان تغییرات انواع کلروفیل. 84
4-3-1-1 تغییرات کلروفیل a در گیاه 40 روزه بنفشه آفریقایی.. 84
4-3-1-3 تغییرات کلروفیل کل (a+b) در گیاه 40 روزه بنفشه آفریقایی.. 86
4-4 تغییرات میزان قندهای محلول در گیاه 40 روزه بنفشه آفریقایی.. 87
4-5 تغییرات میزان قندهای نامحلول(نشاسته) در گیاه 40 روزه بنفشه آفریقایی.. 88
یک مطلب دیگر :
4-6 تغییرات میزان آنزیم پراکسیداز در گیاه 40 روزه گیاه بنفشه آفریقایی.. 89
4-7 تغییرات میزان آنزیم کاتالاز در گیاه 40 روزه بنفشه آفریقایی.. 90
4-8 تغییرات میزان پرولین در گیاه 40 روزه بنفشه آفریقایی.. 91
4-9 تغییرات میزان پروتئین در گیاه 40 روزه بنفشه آفریقایی.. 92
فصل پنجم/ بحث و نتیجه گیری
5- 1 بررسی اثر شوری بر پارامترهای رشد. 94
5-1-1 وزن خشک و وزن تر گیاه: 94
5-2 اثر تنش شوری بر محتوای کلروفیل: 95
5-3 اثر شوری بر محتوای پرولین در بنفشه آفریقایی: 97
5-4 اثر شوری بر میزان فعالیت آنزیمهای آنتی اکسیدانی در بنفشه آفریقایی.. 99
5-4-1 فعالیت کاتالاز: 99
5-4-2 پراکسیداز: 100
5-5 اثر شوری بر میزان پروتئین: 101
5-6 اثر شوری بر میزان اسمولیتها 102
5-6-1 قندهای محلول: 102
5-6-2 قندهای نا محلول: 102
5-7 نتیجه گیری نهایی: 104
5-8 پیشنهادات.. 105
منابع. 106
چکیده
گیاهان برای مقابله با اثرات مضر تنش شوری استراتژیهای متفاوتی را در پیش میگیرند که میتوان به پایین نگهداشتن پتانسیل آب درونی خود با انباشتن انواع اسمولیتهای سازگار، افزایش آنزیمهای آنتی اکسیدانی، حمایت از فعالیت فتوسنتز و حفظ هموستازی یونها اشاره کرد. در این پژوهش اثر غلظتهای مختلف کلرید سدیم NaCl (0، 0.5، 1، 1.5، 2 و4) میلی گرم بر لیتر بر برخی خصوصیات فیزیولوژیکی، مورفولوژیکی و بیوشیمیایی گیاه زینتی بنفشه آفریقایی در شرایط کشت بافت گیاهی با استفاده از محیط کشت موراشی و اسکوک MS مورد بررسی قرار گرفت. آزمایشات در قالب طرح کاملا تصادفی و در سه تکرار در شرایط آزمایشگاهی انجام گردید .آنالیزهای آماری دادهها با استفاده از نرم افزار SPSS انجام شد. میانگینها با استفاده ازآزمون دانکن در سطح ( 0.05≤ P) مقایسه شد. برای رسم نمودارها از نرم افزار EXCEL استفاده گردید. نتایج آنالیز آماری آزمایشهای پارامترهای رشد نشان داد که با افزایش غلظت نمک کلرید سدیم، میزان وزن ترو وزن خشک گیاه افزایش یافت. و همچنین وزن مخصوص برگ ALW وسطح برگ افزایش داشت . نسبت سطح برگی LAR و تعداد برگها کاهش یافت. تیمار نمک باعث افزایش در یونهای سدیم، کلر، محتوای پرولین ، پراکسیداز، آنزیم کاتالاز و قندهای محلول گردید. و همچنین باعث کاهش در محتوای قندهای نامحلول، میزان پروتئین و میزان رنگیزههای فتوسنتزی از جمله کلروفیلهای (a,b,ab) گردید.
واژگان کلیدی: کلرید سدیم ، پراکسیداز، کاتالاز، کشت بافت، بنفشه آفریقایی
مقدمه
بنفشه آفریقایی گیاهی زیبا با نام علمی ionantha Saintpaulia ازتیره Gesneriaceaeونام معمول Afrecan violet میباشد. این گیاه مهمترین گونه زینتی از میان 20 گونه متعلق به جنس Saintpaulia است. بنفشه آفریقایی به عنوان عروس گل های آپارتمانی در اروپا مطرح است که نقش بسزایی در فراهم آوردن محیطی آرام وزیبا بازی میکند. بنفشه آفریقایی در سال 1892درشرق آفریقا توسط بارون والتر فونت سنت پل کشف گردید. او به افتخارنام خانوادگی خود که برای اولین بار این گیاه را کشف نموده بود،آن را سنت پولیا نام گذاری کرد. آب هوای حارهای، شرایط مناسبی برای رشد این گیاه می باشد(استیود [1]،1998). این گیاه بومی نقاط گرمسیری آفریقای جنوبی است و از لحاظ کروموزومی دیپلوئید بوده وبه صورت 302n=است(مایرانتو[2]،2005). بنفشه آفریقایی گیاهی نهاندانه بوده و بذرهای آن در تخمدان گل محفوظ می ماند. جزء گیاهان دو لپه است. این گیاه جام لولهای کوتاه داردوجام گل به طور معمول دو لپه است، یعنی به دو دسته گلبرگهای بالا وپائین تقسیم میشود. هر یک از گلها دارای 2-4 بساک، مسئول تولید گرده بوده که به انتهای گل متصل است و نزدیک تخمدان قرار دارد. برگهای سبز مخملی و کرکدار در روی ساقه فشرده و کوتاه قرار دارند. ساقه که گلها را بر روی خود نگه میدارد از دو قسمت اصلی وفرعی تشکیل شده است. رنگ بنفش گل این گیاه در یک دوره گلدهی ممکن است به صورت تیره ویا روشن در آید و در دوره دیگر به دلیل نوسانات اسیدی یا قلیایی بودن خاک، اثرآبیاری ویا کود دهی، تبدیل به ارغوانی شود. سبزی برگ بنفشه آفریقایی گاهی به صورت دو رنگ دیده میشود که علت آن وجود رنگدانههای کلروفیل، کاروتن و آنتوسیانین است، که در هر سلول برگ وجود دارد. دلیل ابلق بودن برگ در این گیاه نبود کلروفیل در قسمتی از برگ است. گیاهان با برگهای ابلق به طور عموم گیاهان ضعیفتری هستند واحتیاج به مراقبت و توجه بیشتری دارند. بنفشه آفریقایی نسبت به طول روز بی تفاوت است و به همین علت در طول سال گل می دهد. رنگ گلها متنوع به رنگ بنفش، آبی، قرمز، صورتی و سفید ظاهرمیشوند. گلها به صورت پرپروکم پر وپرچمها طلایی وبه طرززیبایی از وسط گلها بیرون زده اند. بطوریکه تناقص در رنگ پرچمها و گلبرگها گل را بصورت یکی از زیباترین مینیاتورهای گیاهی درآورده است. رعایت بعضی نکات پرورشی مانند هوای به نسبت خنک، نور کم واستفاده از کود بدون نیتروژون باعث بروز برگهای ابلق میگردد. به طور کلی این گیاه به دو شکل رشد میکند:1-رشد گیاه با برگهای متقارن و مشابه گل رز که شکل رایج رشد است.
2-رشد گیاه بصورت رونده که اغلب برای قرار دادن گلدانهای آویز بسیار مناسب است(چارلز[3] ،1988 ).
اولین جشنواره بنفشه آفریقایی در 1946 میلادی در آتلانتا برگزارشد. شهرت این گیاه در حدی است که امروزه در بسیاری از کشورهای مدرن میتوان آن را مشاهده کرد. (کامپرز[4]،2009).
کشت بافت:
فرم در حال بارگذاری ...
[شنبه 1399-08-10] [ 08:54:00 ق.ظ ]
|