فهرست مطالب | |||
عنوان | صفحه | ||
فهرست مطالب……………………………………………………………………………………………………………………………………….. | هشت | ||
چکیده………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. | 1 | ||
فصل اول: مقدمه…………………………………………………………………………………………………………………………………… | 2 | ||
فصل دوم: کلیات و مرور منابع………………………………………………………………………………………………………………….. | 5 | ||
2-1- کلیات………………………………………………………………………………………………………………………………………….. | 5 | ||
2-1-1- ترکیبات شبه آندروژنی………………………………………………………………………………………………………………. | 10 | ||
2-1-2- ترکیبات شبه استروژنی……………………………………………………………………………………………………………….. | 10 | ||
2-1-3- اثرات زیستی ترکیبات مخرب سیستم درونریز (ترکیبات شبه استروژنی)…………………………………………….. | 11 | ||
2-1-3- الف- ویتلوژنین و سایر پروتئینهای تولیدمثلی مخصوص جنس ماده…………………………………………………… | 11 | ||
2-1-3- ب- مطالعات فیزیولوژیک و رفتاری…………………………………………………………………………………………….. | 13 | ||
2-1-3- ج- شاخصهای وضعیت……………………………………………………………………………………………………………. | 14 | ||
2-2- مرور منابع…………………………………………………………………………………………………………………………………… | 14 | ||
2-2-1- فراسنجههای خونی……………………………………………………………………………………………………………………. | 14 | ||
2-2-2- بافتشناسی گناد، GSI و نسبت جنسی………………………………………………………………………………………….. | 15 | ||
2-2-3- تولید ویتلوژنین و ارزیابی بیان نسبی آن…………………………………………………………………………………………… | 16 | ||
فصل سوم: مواد و روشها……………………………………………………………………………………………………………………….. | 18 | ||
3-1- معرفی گونه مورد مطالعه…………………………………………………………………………………………………………………. | 18 | ||
3-2- ایستگاههای نمونه برداری………………………………………………………………………………………………………………… | 19 | ||
3-3- زیستسنجی…………………………………………… …………………………………………………………………………………… | 20 | ||
3-4- فراسنجههای خونی………………………………………………………………………………………………………………………… | 20 | ||
3-4-1- اندازهگیری هموگلوبین………………………………………………………………………………………………………………. | 20 | ||
3-4-2- اندازهگیری هماتوکریت………………………………………………………………………………………………………………. | 21 | ||
3-4-3- شمارش گلبولهای قرمز……………………………………………………………………………………………………………… | 21 | ||
3-4-4- شمارش گلبولهای سفید……………………………………………………………………………………………………………… | 22 | ||
3-4-5- شمارش افتراقی گلبولهای سفید…………………………………………………………………………………………………… | 23 | ||
3-4-6- شاخصهای ثانویه خونشناسی……………………………………………………………………………………………………… | 23 | ||
3-4-6- الف- حجم متوسط گویچه قرمز (MCV)……………………………………………………………………………………… | 23 | ||
3-4-6- ب- میانگین غلظت هموگلوبین ذرهای (MCHC)…………………………………………………………………………… | 23 | ||
3-4-6- ج- میانگین هموگلوبین ذرهای (MCH)………………………………………………………………………………………… | 23 | ||
3-5- تعیین سن……………………………………………………………………………………………………………………………………… |
24 | ||
3-6- محاسبه شاخص توسعه گنادی (GSI)………………………………………………………………………………………………… | 24 | ||
3-7- تهیه بافت گناد……………………………………………………………………………………………………………………………….. | 24 | ||
3-8- آمادهسازی نمونهها جهت مطالعات مولکولی و اندازهگیری بیان ژن ویتلوژنین……………………………………………. | 24 | ||
3-8-1- نمونهبرداری و تیمار…………………………………………………………………………………………………………………… | 25 | ||
3-8-2- استخراج و تعیین کمیت و کیفیت RNA………………………………………………………………………………………… | 25 | ||
3-8-3- سنتز cDNA……………………………………………………………………………………………………………………………. | 26 | ||
3-8-4- همسانهسازی cDNA نسبی ویتلوژنین در Petroleuciscus esfahani……………………………………………… | 26 | ||
3-8-5- همسانهسازی cDNA نسبی بتا-اکتین در P. esfahani……………………………………………………………………. | 27 | ||
3-8-6- بسط ویتلوژنین به سمت انتهای َ3 …………………………………………………………………………………………………… | 27 | ||
3-8-7- تکثیر سریع دوانتهای cDNA (RACE) در ویتلوژنین………………………………………………………………………. | 28 | ||
3-8-8- تکثیر سریع دوانتهای cDNA در بتا-اکتین……………………………………………………………………………………… | 28 | ||
3-8-9- آنالیز توالیها…………………………………………………………………………………………………………………………….. | 28 | ||
3-8-10- ترسیم درخت فیلوژنی برای پروتئین ویتلوژنین در عروسماهی زایندهرود……………………………………………. | 29 | ||
3-8-11- اندازهگیری بیان ژن از طریق PCR کمی (QPCR) رونوشت معکوس………………………………………………. | 29 | ||
3-9- مقایسات آماری……………………………………………………………………………………………………………………………. | 32 | ||
فصل چهارم: نتایج و بحث………………………………………………………………………………………………………………………… | 33 | ||
4-1- شاخصهای زیستی ماهیان صید شده………………………………………………………………………………………………….. | 33 | ||
4-2- ویژگیهای فیزیکوشیمیایی آب در ایستگاههای نمونهبرداری………………………………………………………………….. | 34 | ||
4-3- فراسنجههای خونی………………………………………………………………………………………………………………………… | 35 | ||
4-4- شاخص توسعه گنادی، بافتشناسی گناد و نسبت جنسی………………………………………………………………………… | 39 | ||
4-4-1- شاخص توسعه گنادی…………………………………………………………………………………………………………………. | 39 | ||
4-4-2- مطالعه میکروسکوپی توسعه گنادی……………………………………………………………………………………………….. | 41 | ||
4-4-3- نسبتجنسی……………………………………………………………………………………………………………………………… | 43 | ||
4-5- مطالعات مولکولی………………………………………………………………………………………………………………………….. | 45 | ||
4-5-1- تعیین کمیت و کیفیت RNA……………………………………………………………………………………………………….. | 45 | ||
4-5-2- توالی کامل cDNA ویتلوژنین در Petroleuciscus esfahani……………………………………………………….. | 49 | ||
4-5-3- توالی کامل cDNA بتا-اکتین در P. esfahani……………………………………………………………………………… | 52 | ||
4-5-4- ترسیم درخت فیلوژنی برای پروتئین ویتلوژنین در عروسماهی زایندهرود……………………………………………… | 54 | ||
4-5-5- اندازهگیری بیان ژن ویتلوژنین………………………………………………………………………………………………………. | 56 | ||
فصل پنجم: نتیجهگیری کلی و پیشنهادها……………………………………………………………………………………………………… |
60 | ||
5-1- نتیجهگیری……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. | 60 | ||
5-2- پیشنهادها…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. | 61 | ||
منابع……………………………………………………………………………………………………………………………………………………. | 62 | ||
ده |
ده |
برای دیدن جزییات بیشتر و دانلود پایان نامه اینجا کلیک کنید
فهرست اشکال | ||
عنوان | صفحه | |
شکل 2-1- ساختار شیمیایی برخی از ترکیبات مخرب سیستم درونریز……………………………………………………………. | 7 | |
شکل 2-2- نمودار شماتیک از محور HPG در ماهیان………………………………………………………………………………….. | 9 | |
شکل 2-3- مسیرهای اصلی عملکرد ترکیبات شبهاستروژنی موجود در محیط……………………………………………………. | 12 | |
شکل 2-4- مکانیسم اثر هورمون استرادیول در تولید VTG و Zrp در ماهیان……………………………………………………. | 13 | |
شکل 3-1- عروسماهی زایندهرود صید شده از رودخانه زاینده رود…………………….. ………………………………………… | 18 | |
شکل 3-2- موقیعت جغرافیای ایستگاههای نمونهبرداری………………………………………………………………………………… | 19 | |
شکل 3-3- ایستگاه چمگردان………………………………………………………………………………………………………………….. | 20 | |
شکل3-4- خونگیری از ساقه دمی عروسماهی زایندهرود…………………………………………………………………………….. | 21 | |
شکل 3-5- لام هماسیتومتر………………………………………………………………………………………………………………………. | 22 | |
شکل 4-1- ساختار ماکروسکوپی بیضه و تخمدان در عروسماهی زایندهرود…………………………………………………….. | 39 | |
شکل 4-2- مقایسه میانگین GSI جنس نر عروسماهی زایندهرود در ایستگاههای مختلف……………………………………. | 40 | |
شکل 4-3- مقایسه میانگین GSI جنس ماده عروسماهی زایندهرود در ایستگاههای مختلف………………………………… | 40 | |
شکل 4-4- تصویر گناد جنس ماده در ایستگاه خرسونک و چمگردان…………………………………………………………….. | 43 | |
شکل 4-5- نمودار ترسیم شده توسط دستگاه بیوآنالیزور برای نمونه RNA شماره 5 متعلق به ایستگاه چشمهدیمه…….. | 48 | |
شکل4-6- توالی نوکلئوتید و آمینواسید ویتلوژنین در P. esfahani……………………………………………………………….. | 51 | |
شکل4-7- توالی نوکلئوتید و آمینواسید بتا-اکتین در P. esfahani………………………………………………………………. | 53 | |
شکل 4-8- آنالیز فیلوژنیکی توالیهای پروتئین ویتلوژنین در P. esfahani و سایر مهرهداران……………………………… | 55 | |
شکل 4-9- منحنی استاندارد غلظتهای مختلف cDNA ویتلوژنین در QPCR………………………………………………… | 56 | |
شکل 4-10- منحنی استاندارد غلظتهای مختلف cDNA بتا-اکتین در QPCR……………………………………………….. | 56 | |
شکل 4-11- مقایسه میانگین بیان ژن VTG در جنس ماده عروسماهی زایندهرود در ایستگاههای مختلف……………… | 57 | |
شکل 4-12- مقایسه میانگین بیان ژن VTG در جنس نر عروسماهی زایندهرود در ایستگاههای مختلف…………………. | 58 | |
یازده |
یک مطلب دیگر :
فهرست جداول | ||
عنوان | صفحه | |
جدول 2-1- معرفی برخی از EDCها به همراه برخی منابع تولیدکننده و اثرات احتمالی آنها بر زیستمندان……………… | 6 | |
جدول 3-1- محل و موقعیت جغرافیایی صید عروسماهی زایندهرود…………………………………………………………………. | 20 | |
جدول 3-2- اولیگونوکلئوتیدهای طراحی شده برای حصول قطعات مورد نظر در ویتلوژنین و بتا-اکتین…………………… | 31 | |
جدول 4-1- ویژگیهای زیستی ماهیان صید شده در ایستگاههای نمونهبرداری رودخانه زایندهرود…………………………. | 34 | |
جدول 4-2- ویژگیهای فیزیکوشیمیایی آب در ایستگاههای نمونهبرداری………………………………………………………….. | 35 | |
جدول 4-3- میانگین برخی از فاکتورهای خونی در عروسماهی زایندهرود در ایستگاههای مختلف………………………… | 36 | |
جدول 4-4- میانگین شاخصهای محاسبهای گلبولهای قرمز در عروسماهی زایندهرود در ایستگاههای مختلف……….. | 37 | |
جدول 4-5- میانگین درصد گلبولهای سفید مشاهد شده در عروسماهی زایندهرود در ایستگاههای مختلف ……………. | 38 | |
جدول 4-6- قطر تخمک در ماهیان صید شده در ایستگاههای مختلف نمونهبرداری……………………………………………… | 42 | |
جدول 4-7- نسبت جنسی ماهیان صید شده در ایستگاههای مختلف نمونهبرداری…………………………………………………. | 44 | |
جدول 4-8-کمیت و کیفیت نمونههای RNA………………………………………………………………………………………………. | 46 | |
جدول 4-9- میزان شباهت توالی کامل نوکلئوتید ویتلوژنین در P. esfahani با برخی دیگر از گونهها……………………. | 49 | |
جدول 4-10- میزان شباهت توالی کامل آمینواسید ویتلوژنین در P. esfahani با برخی دیگر از گونهها………………….. | 49 | |
جدول 4-11- میزان شباهت توالی کامل نوکلئوتید بتا-اکتین در P. esfahani با برخی دیگر از گونهها………………….. | 52 | |
جدول 4-12- میزان شباهت توالی کامل آمینواسید بتا-اکتین در P. esfahani با برخی دیگر از گونهها………………….. | 52 | |
دوازده |
[پنجشنبه 1399-08-08] [ 02:08:00 ق.ظ ]
|