اثر چند شکلی های ژن GH بر صفات رشد در ماهی سفید دریای ... |
2-4 سن بلوغ. 10
2-5 رشد و عوامل موثر بر آن.. 10
2-5-1 تنظیم رشد. 11
2-5-2 هورمون رشد. 11
2-5-3 کنترل ترشح هورمون رشد. 12
2-5-4 اثرات متابولیکی هورمون رشد. 12
2-5-4-1 افزایش سرعت پروتئین سازی در بیشتر سلولهای بدن.. 12
2-5-4-2 افزایش رونویسی هستهای DNA برای ساخت RNA… 13
2-5-4-3 افزایش میزان چربیها برای تولید انرژی.. 13
2-5-4-4 کاهش مصرف کربوهیدراتها 13
2-6 ژن هورمون رشد. 13
2-7 نشانگرهای ژنتیکی.. 14
2-7-1 نشانگرهای ریخت شناسی.. 15
2-7-2 نشانگرهای فیزیولوژیکی.. 15
2-7-3 نشانگرهای سیتوژنتیکی.. 15
2-7-4 نشانگرهای پروتئینی.. 15
2-7-5 نشانگرهای DNA یا نشانگرهای مولکولی.. 16
2-8 نشانگرهای DNA مبتنی بر واکنش زنجیرهای پلیمراز 16
2-9 واکنش رنجیره ای پلیمراز (PCR) 17
2-9-1 بافر RCR.. 18
2-9-2 کلرید منیزیم (Mgcl2) 18
2-9-3 دی اکسی نوکلئوتیدها (dNTPs) 18
2-9-4 آنزیم تک پلیمراز 19
2-9-5 آغازگرها 19
2-10 چند شکلی فضایی رشتههای منفردSSCP) ) 19
2-11 مروری بر برخی پژوهشهای انجام شده: 20
فصل سوم. 22
مواد و روشها 22
3-1 نمونه برداری.. 23
3-2 بررسی فاکتور وضعیت… 23
3-3 استخراج DNA به روش نمکی بهینه یافته. 23
برای دیدن جزییات بیشتر و دانلود پایان نامه اینجا کلیک کنید
3-3-1 طرز تهیه بافرهای استخراج DNA… 23
3-4 تعیین ویژگیهای کمی و کیفی DNA استخراج شده: 24
3-4-1 ژل آگارز 24
3-4-2 رنگ آمیزی ژل آگارز 25
3-5 تعیین غلظت DNA استخراج شده با استفاده از اسپکتوفتومتر. 26
3-6 واکنش زنجیرهای پلیمراز (PCR) 26
3-6-1 پروتکل و مواد استفاده شده در PCR.. 26
3-6-2 مراحل PCR.. 27
3-6-3 تنظیم سیکلهای حرارتی PCR.. 28
3-6-3-1 واسرشته سازی قطعه الگو. 28
3-6-3-2 اتصال آغازگرها: 28
3-6-3-3 بسط (طویل سازی) آغازگرها: 28
3-7 چندشکلی فضایی در تک رشته DNA (SSCP) 29
3-8 الکتروفورز محصولات SSCP روی ژل اکریل آمید. 30
3-8-1 تهیه ژل پلی اکریل آمید. 30
3-8-2 آماده سازی دستگاه الکتروفورز عمودی.. 31
3-8-3 رنگ آمیزی با نیترات نقره 32
3-8-3-1 مراحل انجام رنگ آمیزی نیترات نقره: 32
3-9 مراحل انجام کار 33
3-10 تعیین توالی الگوهای باندی مشاهده شده در جمعیت مورد مطالعه. 34
3-11 تجزیه تحلیل دادهها 34
3-11-1 تجزیه و تحلیل آماری ژنتیک جمعیت و ارتباط نشانگر- صفت… 34
3-11-2 تجزیه و تحلیل بیوانفورماتیک توالیهای به دست آمده 35
فصل چهارم. 36
نتایج.. 36
4-1 بررسی کمیت و کیفیت DNA استخراج شده 37
4-2 تکثیر قطعات مورد نظر. 37
4-2-1 ژن GH-2 ماهی سفید. 37
یک مطلب دیگر :
4-2-2 ژن GH-1 ماهی کپور معمولی.. 38
4-3 الگوهای باندی مشاهده شده جایگاه GH… 38
4-3-1 ژن GH-2 ماهی سفید. 38
4-3-1-1 بررسی فاکتور وضعیت ماهی سفید. 39
4-3-1-2 بررسی ارتباط بین نشانگر- صفت در جایگاه GH-2 ماهی سفید. 39
4-3-2 ژن GH-1 ماهی کپور معمولی.. 40
4-3-2-1 بررسی فاکتور وضعیت کپور معمولی.. 41
4-3-2-2 بررسی ارتباط بین نشانگر- صفت در جایگاه GH-1 ماهی کپور معمولی.. 41
4-5 تجزیه و تحلیل بیوانفورماتیک… 42
4-5-1 توالی یابی.. 42
4-5-2 مقایسه توالی GH-2 ماهی سفید و ماهی کپور معمولی.. 43
4-6 تعیین ژنوتیپ الگوهای باندی جایگاه GH-2 ماهی سفید پس از توالییابی.. 47
4-7 برآورد مقدار وفور ژنی و ژنوتیپی جایگاه GH-2 ماهی سفید. 48
فصل پنجم. 50
بحث و نتیجه گیری.. 50
5-1 بحث و نتیجه گیری.. 51
5-2 پیشنهادات.. 53
منابع. 54
پیوستها: 60
فهرست اشکال و جداول و نمودارها
شکل 2-1 ماهی سفید. 8
شکل 2-2 کپور معمولی.. 9
شکل 3-1 دستگاه الکتروفورز افقی.. 25
جدول 3-1 اجزای تشکیل دهنده بافر بارگذاری.. 26
جدول 3-2 مواد استفاده شده در واکنش زنجیرهای پلیمراز 27
شکل 3-2 دستگاه ترموسایکلر. 27
جدول 3-3 توالی آغازگر اختصاصی برای جایگاه GH… 28
جدول 3-4 دماهای استفاده شده در سیکلهای PCR (درجه سانتیگراد) 29
جدول 3-5 زمانها و تعداد سیکلهای استفاده شده در PCR.. 29
جدول 3-6 مواد لازم جهت تهیه بافر بارگیری SSCP.. 30
جدول 3-7 مواد لازم برای تهیه 65 میلی لیتر ژل اکریل آمید. 31
جدول 3- 8 مواد لازم جهت تهیه محلول ثابت کننده 32
جدول 3-9 مواد لازم جهت تهیه محلول رنگآمیزی.. 32
جدول 3-10 مواد لازم جهت تهیه محلول ظاهرسازی.. 33
شکل 4-1 نمونههای از DNA استخراج شده به روش نمکی بهینه یافته. 37
شکل 4-2 محصولات PCR یک قطعه از ناحیه اگزون 4، اینترون 4 و اگزون 5 برای ژن GH-2 در ماهی سفید. 37
شکل 4-3 محصولات PCR یک قطعه از ناحیه اگزون 4، اینترون 4 و اگزون 5 برای ژن GH-2 در ماهی کپور معمولی 38
شکل 4-4 نمونهای از باندهای SSCP ژن GH-2 ماهی سفید. 38
جدول 4-1 فراوانی الگوهای باندی مشاهده شده در نمونههای مطالعه شده 39
جدول 4-2 بررسی فاکتور وضعیت ژنوتیپ های مشاهده شده در ماهی سفید. 39
جدول 4-3 جدول ANOVA و آنالیز آماری GLM برای ماهی سفید. 39
جدول 4-4 نتایج مقایسه میانگین حداقل مربعات الگوهای باندی مختلف برای صفت فاکتور وضعیت ماهی سفید. 40
شکل 4-5 هشت الگوی باندی مشاهده شده در جایگاه ژن GH-1 ماهی کپور معمولی.. 40
جدول 4-5. فراوانیهای ژنوتیپی جایگاه ژنی GH-1 مشاهده در 150 نمونه ماهی کپور مطالعه شده 40
جدول 4-6 بررسی فاکتور وضعیت ژنوتیپ های مشاهده شده در ماهی کپور معمولی.. 41
جدول 4-7 جدول ANOVA و آنالیز آماری GLM برای ماهی کپور معمولی.. 41
جدول 4-8 نتایج مقایسه میانگین حداقل مربعات الگوهای باندی مختلف ژن GH-1 برای صفت وزن ماهی کپور معمولی 42
شکل 4-6 مقابسه توالیها بین نمونههای ماهی سفید با ژنوتیپ دارای الگوهای باندی A، B و C.. 43
شکل 4-7 هم ترازی سه نمونه ارسال شده ماهی سفید برای توالی یابی. 44
فرم در حال بارگذاری ...
[پنجشنبه 1399-08-08] [ 12:58:00 ق.ظ ]
|