عنوان		صفحه
چکیده		1
مقدمه		2
فصل اول: مروری بر تحقیقات گذشته
1- گیاهشناسی سیب زمینی		4
1-1) برگ		4
1-2) ساقه		4
1-3) غده		5
1-4) جوانه		5
1-5) ریشه		5
1-6) گل		5
2- ارقام سیب زمینی		5
2-1) رقم‌هاى خیلى ‌زودرس و زودرس		5
2-2) رقم­‌هاى متوسط رس یا میان‌رس		6
2-3) رقم­‌هاى دیررس		6
3- تاریخچه		7
4- مواد موجود در سیب زمینی		8
5- مراحل کشت سیب زمینی		8
5-1) آماده كردن زمین برای كاشت سیب­زمینی		8
5-2) آماده‌کردن غده­‌ها براى کاشت سیب­زمینی		9
5-3) کاشتن غده­‌ها		10
5-4) آبیاری سیب زمینی		11
5-5) كوددهی سیب­زمینی		11
5 -6) وجین كردن و خاك دادن سیب­زمینی		12
5-7) برداشت		13
6- مراحل پس از برداشت و فرآوری سیب زمینی		14
7- اهمیت اقتصادی سیب­زمینی		15
8- ویروس­های بیماریزای سیب­زمینی		17
9- ویروس ایكس سیب­زمینی Potato virus X		20
9-1) آرایه­بندی		20
9-2) علائم		21
9-3) دامنه میزبانی طبیعی ویروس ایكس سیب­زمینی		22
9-4) گونه های میزبانی بكار رفته جهت تشخیص PVX		23
9-5) انتقال و انتشار ویروس		23
9-6) پراکنش جغرافیایی		24
9-7) خصوصیات ژنوم		24
9-8) خصوصیات پیكره ویروس		26
9-9) تکثیر ویروس ایکس سیب­زمینی در گیاه		27
9-10) تنوع ژنتیكی ویروس ایكس سیب­زمینی		28
10- روش­های ردیابی ویروس ایكس سیب­زمینی		30
10-1) سرولوژی		30
10-2) بررسی­های مولكولی واکنش زنجیره­ای پلی­مراز Polymerase Chain Reaction (PCR)		32
11- مطالعات انجام شده در ایران		37
12- هدف از این تحقیق		40
فصل دوم:مواد و رو ش­ها
1- جمع آوری نمونه از مزارع سیب­زمینی		42
2- آزمون الایزا Enzyme-Linked Immunosorbent Assay- ELISA))		42
2-1) تهیه بافرها		42
2-1-1) بافرفسفات پتاسیم(PH, 7.4), (phosphate buffered saline-PBS)		43
2-1-2) بافر پوششی کربنات سدیم(PH, 9.6) , (Coating buffer)		43
2-1-3) بافر شستشو (PH,7.4),(Washing buffer)		43
2-1-4) بافر عصاره گیری (PH,7.4),(Extraction buffer)		43
2-1-5) بافر ترکیب پادتن-آنزیم (PH,7.4),(Conjugate buffer)		43
2-1-6) بافر زمینه (سوبسترا)(PH, 9.8),(Substrate buffer)		44
3- بررسی­های گلخانه­ای		45
4- بررسی انتقال	46
4-1) بررسی انتقال با سس	46
4-2) انتقال با تماس	46
5- بررسی خصوصیات مولكولی	46
5-1) استخراج آر.ان.ای (RNA Extraction)	46
5-2) واکنش زنجیره­ای پلی­مراز به روش رونوشت برداری برگردان (RT-PCR)	48
5-2-1) مرحله رونوشت برداری برگردان (Reverse transcriptase)	48
5-2-2) مرحله واکنش زنجیره ای پی. سی. آر	48
5-3) مشاهده محصول واكنش	49
5-4) خالص سازی قطعات تکثیر شده	49
5-4-1) جدا کردن قطعه ژل حاوی DNA تکثیر شده	49
5-4-2) حل کردن قطعه ژل و آزاد شده قطعه DNA	49
5-4-3)رسوب دادن DNA	50
5-4-4)شستشوی رسوب با بافر شستشو	50
5-4-5) حل شدن DNA در آب	50
5-6) آنالیز تبارازیی	51
6- خالص سازی ویروس PVX	53
7- اسپکتروفتومتری و تعیین غلظت ویروس جدا شده در آموده های(پرپارسیون) خالص شده	55
فصل سوم:نتیجه گیری
1- بررسی علائم آلودگی­های موجود روی سیب زمینی	56
1-1) علائم آلودگی روی سیب زمینی	56
1-2) نشانه­های آلودگی روی گوجه فرنگی	57
2- آزمون بیولوژیکی (واکنش گیاهان محک در مقابل عصاره حاوی ویروس ایکس)	58
2-1) گل تکمه­ایی Gomphrena globosa L.	58
2-2) داتوره Datura stramonium	59

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

2-3) سلمکChenopodium amaranticolor	59
2-4) توتون Nicotiana glutinosa L	60
2-5) توتون Nicotiana tabacum. cv. White Burley	60
2-6) توتون Nicotiana tabacum. cv. Samsun	61
2-7) گوجه فرنگی Lycopersicum esculentum Mill	61
2-8) لوبیا Phaseolus vulgaris L.cv. Bountiful	61
2-9) باقلا. Vicia faba	61
2-10) ماش. Vicia sativa L.	62
2-11) دامنه میزبانی و علائم	62
3- درجه حرارت غیر فعال شدن (TIP)	63
4- آخرین حد رقت (DEP)	63
5- پایداری ویروس در شرایط آزمایشگاه (LIV)	63
6- مطالعه روش های انتقال	63
6-1) انتقال با سس	63
6-2) انتقال با تماس	63
7- خالص سازی	63
7-1) روشShepard, 1972	63
7-2) روشFribourg,1975	64
7-3) روشMoreira, 1980	65
8- تعیین پراکنش ویروس بر اساس آزمون الایزاELISA	65
9- بررسی خصوصیات مولكولی	72
9-1) نتایج حاصل از استخراج آر.ان.ای كل گیاه (RNA Extraction)	72
9-2) نتایج واکنش رونوشت برداری برگردان زنجیره­ای پلی­مراز (RT-PCR)	73
10) آنالیز تبازایی	74

 

 

 

 

 

یک مطلب دیگر :

[اینفوگرافی]: ۱۰ ستون اصلی و پایه‌ای کارآفرینی

 

فصل چهارم:بحث، نتیجه گیری و پیشنهادات	76
فهرست منابع فارسی	84
فهرست منابع انگلیسی	85
چکیده انگلیسی	96

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

فهرست جداول
عنوان	صفحه
جدول1-1 اسامی ویروس های سیب زمینی	18
جدول 1-2 مقایسه بین ELISA, PCR, IC-PCR, RT-PCR-ELISA	35
جدول1-3 توالی آغازگرهای استفاده شده برای سنتز cDNA جهت ردیابی ویروس ایكس سیب­زمینی	37
جدول2-1 منطقه و تعداد نمونه های جمع آوری شده از مزارع سیب زمینی در همدان	42
جدول2-2 گیاهان میزبانی که برای مایه زنی ویروس ایکس سیب زمینی استفاده شد	45
جدول2-3 آغازگرهای استفاده شده در آزمون RT-PCR	49
جدول2-4 لیست توالی‌های کامل پروتئین پوششی PVX موجود در بانك ژن كه برای مقایسه با جدایه‌های ایرانی مورد استفاده قرار گرفته‌اند	52
جدول3-1درصد نمونه های علائم دار جمع آوری شده از مزارع همدان	57
جدول3-2 علائم ویروس ایکس بروی گیاهان محک	62
جدول 3-3 درصد آلودگی به چهار ویروس PVX، PVY، PVS و PLRV در مناطق بهار، رزن و کبودرآهنگ	65
جدول3-4 درصد آلودگی همزمان در مزارع استان همدان	66